電位測定法測定酶的催化活性:
pH 敏感的玻璃電極可以用于測定那些產生或消耗質子的反應。出于這個目的,利用反 滴定法保持pH 的恒定,所需要的酸或堿的消耗量就可以被測定。電極控制著自動滴定器, 這個概念就是BUCHER 描述的pH-stat 技術。
一個典型的例子是脂肪酶(E.C.3.1.1.3)[9001-62-1]催化活性的測定。
某脂(甘油三酯) 被該酶水解,生產的脂肪酸被NaOH 在pH-stat 的模式下反滴定中和。 甘油三酯+H2O→甘油二酯+脂肪酸 橄欖油作為底物,和含有脂肪酶的稀釋樣品溶液混合溫育,混合物在恒定pH 下滴定。 紀錄器標繪出了NaOH 的消耗量隨時間的變化曲線,所得到的斜率與酶的催化活性相關。
其 他的例子如木瓜蛋白酶(E.C.3.4.22.2)[9001-73-4]的測定和葡萄糖氧化酶(glucose oxidase, E.C.1.1.3.4)[9001-37-0]的測定。
電位測定法
PH的實用定義
電位滴定終點確定
電位測定法的依據是待測離子的活度與其電極電位之間的關系遵守能斯特方程.
電位分析法是利用物質的電化學性質進行分析的一大類分析方法.包括直接電位法和電位滴定法.
直接電位法是利用專用電極將被測離子的活度轉化為電極電位后加以測定,如用玻璃電極測定溶液中的氫離子活度,用氟離子選擇性電極測定溶液中的氟離子活度[1](見離子選擇性電極).
電位滴定法是利用指示電極電位的突躍來指示滴定終點.
兩 種方法的區(qū)別在于:直接電位法只測定溶液中已經存在的自由離子,不破壞溶液中的平衡關系;電位滴定法測定的是被測離子的總濃度.電位滴定法可直接用于有色 和混濁溶液的滴定.在酸堿滴定中,它可以滴定不適于用指示劑的弱酸.能滴定K小于 5×10-9的弱酸.在沉淀和氧化還原滴定中,因缺少指示劑,它應用更為廣泛.電位滴定法可以進行連續(xù)和自動滴定.
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